项目名称:草鱼乳酸脱氢酶(LDH)同工酶纯化和免疫化学反
单位名称:中国水产科学研究院淡水渔业研究中心
单位地址:江苏省无锡市宝界桥
联系人:夏德全
邮政编码:214081
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成果简介:本项目通过纯化LDH,制备制体,进行免疫化学反应,识别鱼类同工酶酶谱和确定亚基构成,其主要内容:从草鱼中纯化出LDH同工酶,并制备成抗体;把草鱼LDH同工酶A、B、C基因的产物LDH-H4,LDH-B4,LDH-C4分别从草鱼肌肉、心脏、肝脏中纯化出来,制成抗体,用免疫双扩散法测定了它们的抗血清效价分别为1/32,1/32,1/8。准确确定了草鱼LDH同工酶酶谱和有关亚基构成。用制成的抗体IgG与草鱼各组织中的LDH同工酶发生免疫化学反应,准确确定草鱼不同组织中的LDH同工酶,按迁移率从快慢,分别为B4、A1B3、A2B2、A3B1、A4。B4在心脏中丰富,A4则在肌肉中丰富;草鱼肝脏中除有A4、A3B1、A2B2、A1B3、B4五个同工酶外,还有C基因产物C4同工酶,电泳图上位于阴极端。准确确定了白鲢、团头鲂等鱼类LDH同工酶酶谱和有关亚基构成。草鱼LDH抗体IgG没有种属特异性,只要同一基因产物的抗体IgG准确确定白链、团头鲂和鲫鱼等鱼类LDH同工酶酶谱和亚基构成,即A、B二个基因产物聚合成五个同工酶,分别为A4、A3B1、A2B2、A1B3、B4;B4在心肌中丰富,带负电,迁移快,趋向阳极;A4在肌肉中丰富,迁移慢;肝脏中还有C基因产物C4同工酶,电泳图上位于阴极端。建立了准确确定淡水鱼类LDH同工酶酶谱新技术。我们把免疫化学反应引入淡水鱼同工酶研究,使酶技术又增添了新的优越性。因为抗原和抗体结合具有高度的专业性,因此抗体可用作同工酶(抗原)活性的特异抑制剂,准确地分析鱼类LDH同工酶酶谱和确定亚基构成。